硫酸铜、甘氨酸铜、碱式氯化铜体外抑菌效果比较

  众所周知，铜离子具有强大的广谱抑菌、杀菌作用，在各行各业中被广泛应用。在养殖生产业中，铜作为饲料添加剂被添加在动物饲料中，主要分为有机铜和无机铜。本试验通过测定硫酸铜、甘氨酸铜、碱式氯化铜的体外最小抑菌浓度，用以比较三种铜的体外抑菌效果。

  材料与方法  

  1、试验材料

  ✦ 硫酸铜（铜含量25.1%）、甘氨酸铜（铜含量23.18%）、碱式氯化铜（铜含量58.82%）均取自新葡萄8883官网科技集团有限公司。

  ✦ 大肠埃希氏菌（CICC10003）购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

  ✦ 培养基：LB液体培养基。

  2、试验方法

  2.1、LB液体培养基的配制

  分别称取胰蛋白胨1 g，氯化钠1 g，酵母粉0.5 g，加入超纯水100 ml，121℃灭菌。

  2.2、试管二倍梯度稀释法测最小抑菌浓度

  样品经二倍稀释法处理后，取样液1ml备用；同时，另外准备两支试管作对照，分别加入1 ml 95%酒精和1 ml LB液体培养基。每支试管中加入1 ml LB液体培养基和100 μl菌液，放入37℃恒温培养箱培养16 h，按照试管编号，最后一支澄清试管中的样品浓度为最小抑菌浓度，每个样品设置2平行。

  结果与分析

  由图1、2可知：本试验中，甘氨酸铜、硫酸铜、碱式氯化铜对大肠埃希氏菌的体外最小抑菌浓度分别为0.0058%、0.0063%、0.1765%，最小抑菌浓度值比较为：甘氨酸铜＜硫酸铜＜碱式氯化铜。

图1 三种添加剂的最小抑菌浓度

图2 最小抑菌浓度实验部分现场图

  本实验结果表明：甘氨酸铜的体外抑菌能力最好，其次是硫酸铜，最后是碱式氯化铜。

  讨论

  最小抑菌浓度通常指抑制微生物生长的最低浓度。研究表明：铜抑菌的主要由于溶解出的铜离子，可穿过细菌细胞膜，破坏蛋白质和细胞合成酶活性，使细菌丧失分裂增殖能力而死亡；其次，铜离子可在光作用下，激活空气和水中的氧，产生的H2O2具有强氧化还原作用，能够有效起到抑菌、杀菌作用。

  本试验中，硫酸铜、甘氨酸铜、碱式氯化铜均表现出良好的抑菌效果，而碱式氯化铜的体外抑菌效果比硫酸铜和甘氨酸铜差，可能是因为碱式氯化铜不溶于水，溶解出的铜离子较少，体外抑菌能力较弱。

  结论

  本试验中，硫酸铜、甘氨酸铜、碱式氯化铜饲料添加剂均表现出良好的抑菌效果，其中甘氨酸铜的体外抑菌效果最佳。

  展望

  本试验为体外抑菌试验，间接的说明了铜离子是抑菌的主效因子，不同的有机配体（本文为甘氨酸）可能对铜离子抑菌有协同作用。我们建议下一步采用动物试验，考察不同剂型、不同铜剂量对动物肠道微生物区系的影响以解决选用何种铜源更环保、更经济。

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